Née un 31 Octobre, Sabrina est une jeune demi-sorcière qui a de la peine à concilier sa sombre éducation de sorcière et sa vie d'étudiante de deuxième année au lycée de Baxter High. Ses parents Edward et Diana Spellman sont morts dans un accident d'avion. Elle a été confiée à ses tantes Hilda et Zelda, bien que la famille de Diana ait apparemment tenté sans succès d'obtenir sa garde. Alors que l'anniversaire de ses 16 ans approche, Sabrina doit faire un choix: accepter sa nature de sorcière et signer son nom dans le Livre de la Bête ou perdre ses pouvoirs et vivre parmi les mortels. 
Intelligente, compatissante et téméraire, elle n'hésite pas à défier la doctrine de l'Église de la Nuit, remettant en question les traditions des sorcières les plus barbares. Son dévouement envers ses amis et sa famille l'amène très souvent parfois à prendre de mauvaises décisions. 

Zelda est la plus dure des sœurs Spellman, bien que sa sévérité et sa façade inébranlable cachent une âme plus maternelle. Fière et dévote, elle pense qu'il n'y a pas plus grand honneur que de servir le Seigneur des Ténèbres en tant que membre de l'Église de la Nuit. Elle est d'ailleurs connue pour être la meilleure sage-femme dans la communauté des sorcières. Avec son porte-cigarette doré et ses tenues élégantes, c'est une femme glamour, sévère, qui aime les sports de contact et le cinéma. Elle est souvent en conflit avec Sabrina mais elle n'hésite pas à briser les règles pour protéger sa famille lorsque c'est nécessaire.

Hilda est la plus gentille des sœurs Spellman qui élève Sabrina, bien que sa douceur cache son côté impitoyable. Guérisseuse et fabricante de potions, elle s'occupe du salon funéraire local, tout en enseignant la sorcellerie à Sabrina. Elle est ce qui se rapproche le plus d'une figure maternelle avec son empathie, sa bienveillance et son sens de l'humour chaleureux. Mais Hilda se révèle aussi très dangereuse si quelqu'un s'en prend aux membres de sa famille. C'est une excellente cuisinière, ayant un faible pour les romans d'amours.

Cousin de Sabrina, Ambrose est un démoniste mais aussi un nécromancien très érudit et plein d'esprit. C'est le neveu d'Hilda Spellman dont elle s'est occupée pendant quelques temps en Angleterre. Condamné par le Conseil des Sorciers pour avoir participé à un complot contre le Vatican, il est assigné à résidence dans la maison des Spellman depuis 75 ans. Depuis il vit en dépression en travaillant dans la morgue au sous-sol. Mais lorsque Sabrina vient lui demander de l'aide, il est toujours prêt à la suivre dans ses combines, peut importe les dangers...

Harvey Kinkle est le petit-ami mortel de Sabrina. Amusant, romantique, charismatique et amical, il réside dans la ville de Greendale et étudie à Baxter High. C'est quelqu'un de sensible qui a perdu sa mère lorsqu'il avait 5 ans. Traumatisé par sa rencontre avec un monstre lorsqu'il avait 8 ans, Harvey refuse de travailler dans les mines de charbon de son père, rêvant de devenir artiste et de quitter Greendale. Son grand frère Tommy Kinkle l'encourage dans cette voie et Harvey peut également compter sur Sabrina en cas de besoin... 

Rosalind Walker est la meilleure amie de Sabrina parmi les mortels. Impétueuse, forte et intelligente, elle a un lien très fort avec sa grand-mère Nana Ruth plutôt qu'avec ses parents qui essaient de la pousser sur un chemin qui ne lui correspond pas. Elle souffre d'une cécité génétique qui touche les femmes de sa famille, les rendant aveugles alors qu'elles sont de jeunes adultes. Cette malédiction l'oblige à lire un maximum de livres avant de perdre définitivement la vue. Elle apprendra que l'apparition de cette cécité s'accompagne aussi du pouvoir de d'avoir des visions.

Susie Putman est une amie de Sabrina à Baxter High. Courageuse, indépendante et optimiste malgré les intimidations qu'elle subit à l'école, elle vit dans une ferme à la périphérique de la ville. Sa rencontre avec Nana Ruth, la grand-mère de Rosie, et le fantôme de son ancêtre Dorothea Putman l'aide à découvrir son identité et à s'affirmer en tant que garçon transgenre... pour devenir Théo!

Madame Wardwell était une professeure intelligente et un peu excentrique de Baxter High jusqu'à ce qu'elle croise un soir la route de Madame Satan. Possédée par cette dernière, elle devient une manipulatrice sensuelle et rusée, servant le Seigneur Obscur. Froide, sadique et déterminée, elle fait tout pour que Sabrina choisisse le chemin de la Nuit.
Son véritable nom est Lilith, la première épouse d'Adam, chassée du Paradis pour avoir refusée de se soumettre à lui. Elle a erré dans le désert jusqu'à ce qu'elle rencontre l'ange déchu Lucifer Morningstar auquel elle a promit son allégeance, devenant la première sorcière de l'Histoire et s’appelant Madame Satan en son honneur. Malgré son entière dévotion, elle rêve de se libérer de son emprise et de s'affirmer comme seule maîtresse des Enfers. 

Grand Prêtre de l'Église de la Nuit et doyen de l'Académie des Arts Invisibles, le Père Blackwood est une figure d'autorité oppressive. Impitoyable et ambitieux, il est aussi misogyne que manipulateur. C'est un ancien démoniste qui a été le mentor du père de Sabrina avant d'être dépassé par ce dernier devenu Grand Prêtre. A la mort d'Edward, Blackwood a reprit le poste, rétablissant des pratiques supprimées par son prédécesseur. Il essaie depuis des années d'avoir un enfant mâle avec sa femme Constance, bien qu'il ait eu une fille illégitime. Il croit en la suprématie masculine des sorciers et se sert de cette excuse pour se livrer à des actes lubriques.

Prudence Night est une sorcière qui fréquente l'Académie des Arts Invisibles avec Agatha et Dorcas, formant les Sœurs du Destin, un trio de sorcières puissantes capables de lire l'avenir. Sa mère s'étant jeté dans une rivière, elle a été recueillie et élevée par Faustus en ignorant qui était son père. Arrogante et ambitieuse, elle nourrit une rancune personnelle et mortelle envers Sabrina. C'est une sorcière cruelle, belle et rusée, mais aussi compatissante surtout en ce qui concerne ses sœurs sorcières.

Nicholas Scratch est un jeune et beau démoniste de l'Académie des Arts Invisibles qui se lie d'amitié avec Sabrina sous les ordres du Seigneur des Ténèbres. Acolyte des enseignements du père de Sabrina, il est confiant, progressiste et aide Sabrina quel que soit ses projets, finissant même par tomber amoureux de la jeune sorcière.